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上海奧析科學儀器有限公司紫外分光光度計測血液
更新時間:2016-09-05 點擊次數:2955

3 1 1 2乙酰色氨酸測定法

本法系用紫外-可見分光光度法(吸收系數法)測定人血

. 230 .

白蛋白供試品中的N -乙酰-DL-色氨酸含量。

測定法用生理氯化鈉溶液將供試品蛋白質稀釋至

5 % ,即為供試品溶液。量取供試品溶液0.1ml,分別加入

生理氯化鈉溶液0. 3m l0. 3m o l/L髙氣酸溶液3. 6ml,

勻;另取生理氣化鈉溶液0 .4 m l,0_3mo l / L 高氣酸溶液

3 .6 m l,混勻,作為空白對照。室溫放置10分鐘,以每分鐘

3500轉離心2 0分鐘,取上清液在波長280nm處測定吸光

度,用空白溶液調零點。按下式計算供試品中的iV-乙酰-

DL-色氨酸含量:

供試品N -乙酰-DL-色氨酸含量—(A Z8。X n)/5 . 25

(mmol/g) P

式中n 為供試品的稀釋系數;

5. 2 5N -乙酰-DL-色氨酸的毫摩爾吸收系數;

P 為供試品的蛋白質含量,g /L

3 1 1 3苯酚測定法

本法系依據溴酸鹽溶液與鹽酸反應產生溴,遇苯酚生成

三溴苯酚,過量的溴與碘化鉀反應釋出碘,析出的碘用硫代

硫酸鈉滴定液滴定,根據硫代硫酸鈉滴定液的消耗量,可計

算出供試品中苯酚的含量。

測定法精密量取供試品lm l ,置具塞錐形瓶中,加水

50ml, 精密加人0 .0 2m o l/L溴溶液(稱取溴酸鉀0.56g,

溴化鉀3g,加水溶解并稀釋至1000ml)15~25ml(供試品含

苯酚量0. 3%.0. 5%時加25ml,小于0. 3%則加15ml) , 沿

瓶壁加人6mol/L鹽酸溶液1 0m l,搖勻,密塞,在暗處放置

30分鐘后,加25%碘化鉀溶液2ml于具塞錐形瓶頸口,稍啟

瓶塞,使流下,密塞,搖勻。以少量水洗瓶頸,用硫代硫酸

鈉滴定液(0.02mol/L)滴定至近終點時,加淀粉指示液約

0.5ml,滴定至藍色消失,并將滴定的結果用空白試驗校正。

按下式計算:

^ 量(;()—(% % )X ^ X 15 69X100

式中V。為空白試驗消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積,ml;

V ,為供試品消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積,ml;

c 為硫代硫酸鈉滴定液的濃度,mol/L;

15. 6 9為苯酚分子量的1 /6。

【附注】(1)硫代硫酸鈉滴定液(0. lm o l/L ) 的制備及標

定稱取硫代硫酸鈉26g與無水碳酸鈉0.20g, 加新沸過的

冷水適量溶解并稀釋至1 0 0 0m l,搖勻,放置1個月后濾過。

取在12CTC干燥至恒重的基準重鉻酸鉀0. 1 5 g ,精密稱定,

置碘瓶中,加水50ml溶解,加碘化鉀2.0g, 輕輕振搖使溶

解,加稀硫酸(5. 7 - 1 0 0 ) 4 0 m l,搖勻,密塞;在暗處放置

10分鐘后,加水250ml稀釋,用本液滴定至近終點時,加

淀粉指示液(稱取可溶性淀粉0.5g,加水5m l混懸后緩緩傾

100ml沸水中,隨加隨攪拌,繼續煮沸2分鐘,冷卻,傾

取上層清液。本液應臨用配制)3ml, 繼續滴定至藍色消失

而顯亮綠色,并將滴定的結果用空白試驗校正。每lm l硫代

硫酸鈉滴定液(0. lm o l/L )相當于4. 903mg重鉻酸鉀。根據

本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量,算出本液的濃度,

即得。

(2 )硫代硫酸鈉滴定液(0.02mol/L) 的制備精密量取

硫代硫酸鈉滴定液(0. lm o l/L ) 100ml, 加水準確稀釋至

5 0 0m l,搖勻。

(3 )可做限度測定。

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